Определение целлюлозолитической активности
Целлюлозолитическая активность была изучена у выделенных культур грибов, наиболее широко представленных родов Peniciliium (29), Aspergillus (25), Fusarium (6), Cephalosporium (3), Mucor (6), родов, известных по литературным данным как активные разрушители целлюлозы Stachybotrys (6), Trichoderma (2), Altemaria (6). а также у двух-трех культур из других родов, менее широко представленных в нашей коллекции. Всего было испытано 125 культур представителей 28 родов.
Опыт проводили на жидкой синтетической среде Чапека, в которой источником углерода служили полоски беззольных фильтров. Значение рН среды после стерилизации было 5,6. Культуры инкубировали при 25—26°. Посев на жидкую среду Чапека производили иглой с 14-суточных культур грибов, выращенных на сусловом агаре. Контролем служили незасеянные пробирки со средой Чапека и беззольным фильтратом. Учет роста грибов производился каждые пять дней в течение двух месяцев.
Определение солетолерантности
Были испытаны представители наиболее массовых родов: Peniciliium (20), Aspergillus (20), Fusarium (3), Stachybotrys (5), Helminthosporium (2) и другие — всего 60 культур. Опыт ставили на жидкой среде Чапека, приготовленной на дистиллированной воде. К основной среде добавляли 1.0 1,8, 2.5. 3,5 и 5,0% NaCl. Стерилизация при 1 атм 30 мин. Среду разливали в пробирки по 5 мл. Посев производили иглой с 2-месячных культур на скошенном агаризованном сусле, приготовленном на морской воде. Контролем служила исходная среда Чапека без добавления NaCl. Инкубация при +25°. Учет роста грибов проводили на пятые и восьмые сутки.
Определение антагонистических свойств
Антагонистическая активность была изучена у 76 культур грибов, относящихся к 19 родам, из которых 30 принадлежали, к Peniciliium, 20 — к Aspergillus и по 1—2 представителям — к другим родам. Изучаемые грибы засевали на жидкое сусло (приготовленное на морской воде) в колбы Эрленмейера и выращивали на качалке. Посев делали иглой с 2-месячных культур грибов, выращенных на сусловом агаре. Засеянные колбы инкубировали при 25—27°. В опытах использовали культуральную жидкость 10-суточного возраста испытуемых грибов.
Антагонистические свойства определяли качественно методом диффузии в агар с применением бумажных дисков. С этой целью стерильные бумажные диски смачивали в культуральной жидкости испытуемых культур грибов и накладывали на поверхность агара в чашках Петри. В качестве тест-микробов использовали Staphylococcus aureus Р-209, Bacillus mycoides, Mycobacterium B-5, Escherichia coli. Candida albicans. Бактериальные тесты выращивали на рыбо-пептонном агаре (РПА). Candida albicans культивировали на сусловом агаре 7° по Баллингу (водопроводная вода). Чашки инкубировали при 37°. Зоны задержки роста замеряли через 24 часа в случае Escherichia coli. Staphylococcus aureus P-209, Bacillus mycoides и через 48 час в случае Candida albicans и Mycobacterium B-5.
Определение способности грибов усваивать нефти
В опытах использовали 46 культур грибов, относящихся к следующим родам: Peniciliium (6) , Aspergillus (10), Fusarium (7), Alternaria (4), Cephalosporium (4), Gliocladium (3). Verticillium (4), по одному представителю родов Trichoderma, Mucor. Stachybotrys, Helminthosporium, Cladosporium и 3 культуры из пинкнидиальных грибов.
Испытуемые грибы выращивали на жидкой среде Чапека, в которой источником углерода служили флотский мазут, соляровое масло и пять видов нефти: малгобекская, анастасьевская, ромашковская, арчадинская и Уруса.
Посев производили иглой с 3—4-недельных культур грибов, выращенных на сусловом агаре (на морской воде). Инкубация засеянных в опытные среды культур грибов осуществлялась при 26—28°. Рост грибов отмечали через каждые пять суток в течение месяца по трехбалльной системе Культуры, давшие хорошую мицелиальную пленку, активно спороносившие, мы оценивали тремя баллами.
Цифры в скобках означают число культур.
